On peut observer, dans le parc national Pukaskwa, des mammifères dans leur habitat naturel, en particulier le long des sentiers et en l'arrière-pays. L’orignal, l’ours noir, le loup gris et le caribou des bois font partie des grands mammifères présents sur le territoire. De plus petites espèces de mammifères comme le castor, la loutre, et le lynx sont également répandues.